Cfh基因敲除小鼠表型

1. 膜增生性肾小球肾炎（MPGN）

H因子缺陷小鼠(Cfh-/-小鼠)会自发发展成膜增生性肾小球肾炎(MPGN)，并且对免疫复合物引起的肾损伤敏感。

打靶策略：外显子3 被替换为Neo casstte（采用ES cell 打靶）。Western blot 分析证实纯合子突变小鼠中缺失编码蛋白。

图1. Cfh-/-小鼠打靶策略

小鼠肾脏病理：26个纯合子中有6个（23%）在8个月大时自然死亡。血清C3显著降低、肾脏组织学异常、自发性膜增生性肾小球肾炎（MPGN）、血尿、蛋白尿。

图2. Cfh-/-小鼠的肾脏病理学。

2. 年龄相关性黄斑变性（AMD）

该疾病西方60岁以上人群视力丧失的最大原因，并且患病率越来越高。许多疾病是由遗传/环境相互作用引起的，50%的AMD病例与补体系统的多态性有关，包括补体因子H。Cfh-/-小鼠在传统的开放环境或无病原体屏障环境中饲养超过9个月。与保持在无病原体环境中的小鼠相比，开放环境Cfh-/-小鼠视网膜下巨噬细胞数量、炎症和应激反应显着增加，光感受器数量减少; 开放环境下Cfh-/-小鼠的视网膜病变程度高于屏障内小鼠。保持在开放环境中的Cfh-/-小鼠在衰老时具有较少的光感受器。因此，当与损害免疫功能的补体缺陷相关时，环境因素会导致这些小鼠的视网膜疾病。

图3. 与维持在无特定病原体环境 (SPF) 中的小鼠相比，Cfh-/-小鼠暴露于常规环境（CE）会导致炎症增加。

Cfh-/-的老年小鼠具有与早期AMD相同的眼部表型。这些特征包括视网膜电图(ERG)反应下降、视力丧失、光感受器组织紊乱和BrM结构异常。这些小鼠也会自发地出现致密沉积病(DDD，又称膜增生性肾小球肾炎II型）样的病理异常。可通过在Cfh-/-小鼠中转入人源CFH基因治疗相关表型，这些人源化CFH小鼠是研究年龄相关性黄斑变性和致密沉积病的分子机制和测试治疗靶点提供有价值的模型。也已证明采用纯化的人CFH（hCFH）制剂在CFH基因敲除小鼠中的有效性。由于AMD的发生涉及多种信号通路及相关基因，其机制尚未明确，若能明确其机制，则基因治疗的选择会有更大余地。

2. 骨疾病

补体系统在骨发育和体内平衡中起作用。CFH 的缺失改变了骨的微观结构，影响成骨细胞和破骨细胞的动力学：16周龄Cfh-/-小鼠股骨的3D重建显示出显着变化。肾功能和组织学保持正常，表明在肾功能障碍之前发生了骨骼变化。CFH 普遍存在于成骨细胞和破骨细胞的细胞质中。CFH缺失引起的变化包括：成骨细胞（362%）和破骨细胞（342%）数量增加，组织蛋白酶K的RNA（180%）和蛋白表达增加，破骨细胞功能增加（凹坑形成，233%）。成骨细胞和破骨细胞中的肌动蛋白重排都发生了改变，破骨细胞外围F-肌动蛋白环的完整性丧失。证明了CFH在维持骨结构和功能方面的直接作用，并被强调为骨病的有希望的治疗靶点。

表1. 16周龄对照小鼠和Fh-/-小鼠骨骼的解剖特征。

补体作为生物进化中天然免疫系统（Innate immune system）的一个主要成份，和细胞因子一样，在人体的生理、病理过程中有很重要的作用。CFH基因突变与多种严重疾病有关，包括罕见的肾脏疾病溶血尿毒综合征（HUS）和膜增生性肾小球肾炎（MPGN），以及更常见的年龄相关性黄斑变性（AMD），是很有潜力的药物治疗靶点。