莫洛尼氏鼠白血病逆转录病毒
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表达载体构建的详细步骤
慢病毒表达载体,即通常所说的穿梭载体,包含了包装.转染.稳定整合所需要的遗传信息.慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白. 为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用 ...
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慢病毒包装技术背景介绍
慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种,慢病毒(Lentivirus)载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷1型病毒)为基础发展起来的病毒载体.具有感染谱广泛.可用于感染依靠传统转染试剂难于转 ...
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逆转录反应建立 | Thermo Fisher Scientific
逆转录反应建立 对于分子生物学实验,逆转录主要用于生成代表组织或细胞特异性RNA群体的互补DNA(cDNA).为使实验成功,需要考虑一些与模板.试剂和反应条件相关的关键注意事项. 本页内容导航: RN ...
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慢病毒载体的使用风险评估
除了需要识别LV本身固有的危害外,还需要对载体使用过程中的风险进行彻底的评估.典型的实验室操作规程包括:(1)操作和处理LV转染细胞实验室,(2)LV悬浮处理,(3)体内实验,包括接种LV悬浮液或者L ...
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哺乳动物基因表达MSCV载体
MSCV(Murine stem cell virus,鼠干细胞病毒)逆转录病毒载体系统是一种非常高效的.能在胚胎干细胞(ES).胚胎癌细胞(EC).造血干细胞(HS)及其他哺乳动物细胞系中大量表达目 ...
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【干货】慢病毒包装教程
慢病毒(Lentivirus) 是逆转录病毒的一种,它能够将靶基因导入到一些较难转染的细胞,如原代细胞等,并且将靶基因随机整合到宿主的基因组中,从而大大增加了感染效率,并且能够在细胞系中稳定表达若干代 ...
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重组腺相关病毒包装构建流程
重组腺相关病毒(Recombinant Adeno-associated Virus, rAAV)是一种功能强大.用途广泛的病毒类载体.AAV属于微小病毒科.依赖病毒属的单链DNA病毒,其基因组大小约 ...
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什么是逆转录酶?
逆转录酶是从RNA模板合成互补DNA(cDNA)链过程中的必需试剂.因此,深入地了解这些酶的性质及其对逆转录的影响,对分子生物学实验的成功至关重要. DNA聚合酶活性 逆转录酶是由不同生化活性的不同结 ...
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慢病毒载体潜在的不利因素
慢病毒载体的主要不良反应实际上是所有逆转录病毒载体的共病,因为它们都是利用逆转录病毒的生存周期,将病毒基因组整合到宿主细胞基因组.一旦感染,这些病毒的单链RNA基因组反转录为双链DNA中间体,然后整合 ...
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哺乳动物基因表达MMLV逆转录病毒载体
MMLV逆转录病毒基因表达载体系统是一种非常高效的,能把外源基因稳定整合到哺乳动物细胞基因组的系统,也是在iPS细胞制备中特别受欢迎的基因转导方法. MMLV逆转录病毒载体来源于莫洛尼(氏)鼠白血病病 ...
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慢病毒包装原理与过程
慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1作为基础发展起来的基因治疗载体,具有能稳定表达外源基因.感染谱广泛.有效感染处于分裂期和静止期的细胞等优点,成为导入外源基因的有效工具.慢病毒已被广泛应 ...
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重组腺相关病毒(AAV)载体构建技术原理
腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)是微小病毒科(parvoviridae)家族的成员之一,是一类无法自主复制.无被膜的二十面体微小病毒,其直径约20-26nm,含有4 ...
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shRNA干扰慢病毒载体是什么?
慢病毒shRNA干扰载体系统是一种非常高效的,能稳定干扰各种哺乳动物细胞靶基因表达的载体工具.一旦病毒基因组被逆转录成DNA并永久整合到宿主细胞基因组中,由人类U6启动子驱动表达的shRNA将会导致靶 ...
